Сразу трём исследовательским группам удалось изолировать протеин BRCA2, соответствующий гену, мутации в каком связаны с развитием рака груди и яичников.
BRCA2 был идентифицирован в 1994 возраста. Известно, что этот ген и сходный ему BRCA1 играют ключевую роль в восстановлении повреждённой ДНК. Протеины, взаимодействующие с BRCA2, уже отделены в чистой форме, но сам белок учёным не наделялся; биологам приходилось работать с его фрагментами или «толстыми вариантами» аналогичных веществ, синтезируемых бактериями или червями. Основной вопросом стал огромный размер BRCA2, в состав коего входит 3 418 аминокислот. Кроме того, он очень нестабилен и обычно обнаруживается в комплексе с другими белками.
Первая научная группа, представляющая Калифорнийский университет в Дэвисе, преодолела затруднения, прибавив к BRCA2 специальную «пометку» — белок, связывающий мальтозу. Это разрешило повысить растворимость протеина и способствовало его свинчиванию, что, в свою очередь, сделало структуру более стабильной. В конечном итоге BRCA2 был выделен в чистой форме из эпителиальных каморок печени мужчины.
| Частицы ферритина (сверху) и BRCA2. Масштабная полоска — 200 нм. (Иллюстрация из журнала Nature Structural & Molecular Biology.) |
Коллеги североамериканских биологов также пользовались «метками», но проводили пробы по несколько отличающимся методикам. Вторая группа, возглавляемая Вольфом-Дитрихом Хойером (Wolf-Dietrich Heyer) из того же Калифорнийского университета, экспрессировала белок в дрожжах, а глава третьей группы, Стивен Уэст (Stephen West) из Лондонского научно-исследовательского установления, предпочёл видоизменение размещения гена BRCA2 в каморках эпителиального рака человека.
Теперь, когда способ выделения «совершенного варианта» BRCA2 известен, специалисты могут приступать к определению строения белка. У них также появляется вероятность исследовать мутации в гене BRCA2, то есть намеренно изменять генетическую последовательность и выслеживать за тем, как это скажется на функционировании протеина.
Полные версии отчётов довольно опубликованы в журналах Nature и Nature Structural & Molecular Biology ([1], [2]).
Подготовлено по веществам Nature News.
